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去美国看病 探针的强度值会导致假阳性

发布日期:2018-03-05

研究发现,染色体免疫沉淀(ChIP)能够检测转录因子结合位点,通过甲醛固定和超声处理,使DNA和蛋白质进行交联,并降解掉未结合的DNA片段。感兴趣的蛋白被各自的抗体标记,以完成免疫沉淀过程。去美国看病服务机构爱诺美康介绍到,结合于这些蛋白的DNA被释放,然后使用微阵列(ChIP-Chip)分析。

有多种方法分析ChIP-Chip数据,平铺阵列的分析模型,通过参照GC含量探针序列和探针拷贝数量,来标准化探针。一些方法使用隐马尔科夫模型,而另一些则使用基于滑窗的方法,来判定ChIP的富集区。去美国看病后,直接使用每一种探针的强度值,作为潜在的DNA蛋白的相互作用点,可能会导致很高的假阳性。

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因而滑窗方法,通常会被建议用来分析ChIP-Chip数据资料,这时固定的窗口沿着基因组移动,然后分析概括落入窗内的所有探针。任何从概括窗口方法得到的峰值,都将被认为是结合位点。类似的,微阵列能够研究表观遗传学的变化,和具体的DNA甲基化。甲基化的DNA片段能通过各种方法得以富集,DNA片段杂交于微阵列以行全面的检测。

去美国看病获得数据资料后,探针强度需要标准化。各种方法可以用来标准化甲基化数据,包括RMA(如前所述),其常常用来分析mRNA表达资料MAT和Potter,将信号强度、序列及所有探针的拷贝数量纳入标准化模型。相似于ChlP-Chip分析,滑窗方法通过基因组区域,来概括探针水平值。滑窗方法的选择依赖于信息资源、生物学则不变。

这些可以通过基于芯片或基于NGS的方法,识别为SNP甲基化敏感性限制性酶富集(MSRE),可以靶向甲基化或非甲基化DN。从而通过PCR扩增,分别富集非甲基化或甲基化片段。去美国看病后,RNA微阵列的出现,描述了过去20年所完成的很多实验研究,相对于以前的技术,例如反转录PCR(RT-PCR)、表达序列标签(EST)分析、基因表达的连续分析。RNA微阵列是更加有效及高通量的全基因组分析,然而RNA微阵列的根本缺陷,在于它只能测定排布于阵列上的探针的丰度。

因此,它无法获得特异同种型的表达、新转录因子的发现、非编码元件谱系、RNA序列变异的鉴定等相关数据。其中,特异同种 型表达和非编码元件谱系,能够通过比较少用的剪接/接合阵列和平铺序列,相结合的方法获得。

去美国看病服务机构爱诺美康介绍到,由于存在潜在的交叉情况,其准确性还不是很清楚随着二代测序技术的出现,RNA测序(RNA-seq)已经克服了这些问题,其可以同时测得DNA的所有转录本序列。被测序的RNA分子被命名为“读取序列”(长度依赖于测序技术,通常30~400bp)。因此,有助于确定所有RNA成分的结构和功能,其超出了已经注释的基因。