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淋巴瘤治疗 聚合酶分析可通过探针完成

发布日期:2018-03-03

通常,采用能检测微球的流式细胞仪,可以增加检测的通量。共同探针的末端,可用于荧光素标记,并具有独特的末端尾巴,则可以杂交到捕获探针。淋巴瘤转诊治疗机构爱诺美康介绍,捕获探针可以单独通过荧光来识别,因此可用于等位基因的检测,在共价连有等位基因特异探针的生物传感器芯片上,进行酶联反应。

可使OLA分析的通量,增加到一个更高的水平,从而可以在一个芯片上同时检测几百个SNP。淋巴瘤转诊治疗,当带有染料的供体寡核苷酸探针,与另一个带有染料(罗丹明染料ROX和TAMARA)的受体探针靠近时,就能检测到荧光共振能量转移(FRET)。滚环扩增方法也利用了FRET,其中只有一个探针(其一端含有等位基因特异序列,另一端含有未标记的常见序列),可用来检测每一个等位基因。

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探针设计有80个核苷酸,所以当它们与目的序列杂交结合时,能够互相靠近而形成一个闭合的环状或者锁式探针结构。淋巴瘤转诊治疗后,退火而连到这个环上的引物,在链置换DNA聚合酶的作用下延伸,所以当初始链完成滚环复制并放大之后,它会不断置换,产生一个长连环,便容易用荧光方法检测到。

用寡核苷酸杂交探针检测SNP,利用聚合酶链式反应进行淋巴瘤转诊的同源基因分析,可以通过杂交探针来完成,如分子信标。分子信标是单链的核酸探针,其具有一个特别的发卡结构(茎-环结构),当它与目的片段结合后会发生重构。它的环状结构与目标序列互补,而茎状结构由两端核酸序列互补配对形成。

淋巴瘤转诊治疗机构爱诺美康介绍,分子信标的一端标记有焚光基团,另一端标记有淬灭基团。结构使两个基团紧紧靠近,但不会产生荧光。淬灭基团对多种发射光谱不同的荧光基团,都有很好的淬灭作用,研究人员可以选择多种可用的荧光基团。在特定温度下完全匹配的杂交片段,会发出比错配片段更强的荧光。

由于发夹结构的存在,分子信标相比于线性探针(如TaqMan探针),具有更好的特异性。通过多达4种颜色标记的分子信标,可以对多种来源的模板,进行基因表达谱分型。淋巴瘤转诊治疗后,由于它们的高特异性,这些寡核苷酸杂交探针应用非常广泛,除了被用于SNP检测如RNA转录定量之外。这些淋巴瘤转诊治疗测定的灵敏度有限,多个步骤耗时较长,并且不适合用于对大片段样品进行快速分析。