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去美国看病 聚合反应会标记不同等位基因

发布日期:2018-03-03

随着荧光技术的迅速发展,更大通量和更精确的奕光标记核酸,进行PCR已经出现。寡核苷酸探针由在末端的报告染料标记,和末端的非荧光淬灭剂标记,在探针完整的情况下,淬灭剂能抑制报告染料的荧光。

去美国看病服务机构爱诺美康介绍到,在PCR期间,探针退火到其特定互补序列。裂解酶释放报告染料,从而导致每个PCR循环荧光量增加,并且只有探针与互补序列结合时才能释放荧光。对于双等位基因系统的等位基因分析,不同等位基因配有不同荧光标记的探针(如FAM、VIC),并都被添加进PCR反应循环中。

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低荧光量说明探针与目的片段结合效率低下,或者发生错配。去美国看病后,只有杂合子才能观察到高亮度荧光,因此带标记的探针被设计为聚合反应,正向引物与特定的SNP等位基因杂交,并用不同颜色的荧光基团,标记不同的等位基因。

因此,去美国看病的扩增期间,不管出现一种荧光还是两种荧光,特定SNP的基因型都能被轻松地确定。因此,TaqMan分析是一个单独的复杂反应,也称为一个SNP反应。虽然它每个反应可以用多种颜色区分三或四重SNP,已被广泛用于GWAS后SNP的验证。进行TaqMan分析,识别出4个SNP与前列腺癌的恶性相关。

去美国看病服务机构爱诺美康介绍到,中高通量基因分型技术,是将探针与紧邻SNP核苷酸序列上游的碱基杂交,随后进行一个迷你测序,其中DNA聚合酶通过在SNP位点,添加单核苷酸来延伸杂交引物。引物延伸产物分析方法有许多种,大多数是检测起始试剂,和引物延伸产物之间物理性质的差别。去美国看病后,引物延伸分析可以用通用引物检测,各个特异引物分别检测每个等位基因。

现在,主要是用前一种方法,比如通用引物(CPE)反应,其中一个引物与邻近SNP位点的末端结合而退火,并在DNA聚合酶作用下延伸。去美国看病后延伸的核苷酸的性状,通过荧光或质量来确定,以此进行SNP的基因分型。