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出国看病 连接酶可与普通引物产生反应

通常情况下，DNA样品被结合的顺磁性颗粒活化，这一步骤少需要250ng的样品。测定的寡核苷酸、杂交缓冲液和顺磁性颗粒，在杂交步骤与经活化的DNA相互结合。出国看病服务机构爱诺美康介绍到，每个SNP基因位点设计3个寡核苷酸，两个寡核苷酸与SNP位点的1个等位基因特异结合，称为等位基因特异性寡核苷酸（AS0）。

当第三个寡核苷酸杂交，在AS0位点下游的1~20个碱基之间，称为位点特异性寡核苷酸（LS0）。这1〜20个碱基，对距离使探针的设计更灵活，以避免SNP侧翼或与SNP相邻的非特异性序列。出国看病后，这3个寡核苷酸都包括，互补性引物位点和通用引物位点。位点特异性寡核苷酸包含唯一一段与特定磁珠芯片互补的序列。

在杂交过程中，分析的核苷酸与绑定了顺磁性颗粒的基因组DNA相结合。由于引物杂交在扩增反应之后进行，这就有效避免了扩增反应给测序带来的偏倚。杂交之后聚合酶延伸，与SNP位点互补的等位基因特异性寡核苷酸，由于使用的聚合酶缺乏链置换或外切酶活性，因此其刚好填满AS0和LS0之间的间隙。

出国看病服务机构爱诺美康介绍到，随着延伸反应的进行，当产物到达位点特异性寡核苷酸位置时，聚合酶将DNA剪切下来，并在DNA连接酶的作用下，AS0和LS0之间的切口被密封起来，从而形成可与普通PCR引物反应的模板。延伸的AS0连接到LS0上，并把SNP位点基因信息加入LS0位点的序列。出国看病后，这些结合产物由3种荧光标记的通用引物PI、P2和P3进行扩增。

不同的细胞色素染料，检测得到的带标记单链DNA产物，经过热循环和热处理而通过其地址序列杂交到，与自己完美互补的芯片上。出国看病服务机构爱诺美康介绍到，DNA产物与Sentrix芯片的杂交，使得SNP基因型能被读出来。同时BeadArray探测仪，能分析在Array芯片或者Bead-Chip上的荧光信号。出国看病中应用的此分析方法，基于微陈列的基因分析扫描平台，可获得分辨率高的荣誉。