出国看病 特异性引物扩增之前需要验证
发布日期:2018-02-24在临床上,用DNA微阵列分析从组织学检测上,来区分不同的肿瘤。有着显著不同分子特征的分子分型,可以解释肿瘤的生物学差异,这可以解释它们对治疗的不同反应,出国看病后有助于确定病人的长期预后。如B细胞淋巴瘤、甲状腺癌、白血病、乳腺癌、结直肠癌、膀胱癌、骨肉瘤、肺癌。形态相似的大B细胞淋巴瘤的基因芯片,分析有两个亚型,它们在基因表达上有不同的分子特征。
出国看病研究发现新基因定位,对肿瘤DNA扩增有反应在基因上。近,Wang等通过源自基因表达数据和分类方法,在基因信号发现了一种预测n期结直肠癌患者预后的方法。抗癌药物耐药性被认为是由多种机制产生的,微阵列为研究这些机制和预测药物的敏感性,细胞途径提供了一种新的方法。
当面临原发灶不明的转移性肿瘤时,DNA微阵列分析也是有帮助的,基于每个实体肿瘤典型的多基因表达谱,出国看病后明确诊断是可能的。虽然原发灶不明的肿瘤,可以通过它们的表达特征得以分类,但它们可能含有与目前已知肿瘤不同的遗传性状。这种不同的特点应进一步探究。然而,如Pentherouclakis等指出的,针对原发部位分子分型的治疗,并不一定对治疗有效和改善预后。尽管基因芯片技术的有巨大潜力,但在临床病理应用方面还存在一些阻碍。
然而,来自手术切除和活检标准的石蜡包埋组织,标本在微阵列实验中并不理想的。出国看病采用甲醛固定可导致RNA降解,石蜡包埋过程中的高温可致RNA发生水解断裂。相反,DNA微阵列实验需要新鲜冰冻标本。DNA芯片需要大M的肿瘤和正常对照组的RNA,寡核背酸阵列需要至少5〜15吨的RNA组织,cDNA阵列需要高达100|xg的RNA。
因此,从细针活检和LCM样本得到的RNA都需要扩增。在出国看病过程中,使用外显子近端和远端的特异性引物扩增之前或之后,都需要额外的验证步骤。例如,无处不在的延伸因子。这就使得程序十分繁琐和耗费劳力。作为基础研究,在临床设置一些基因,可能是在翻译水平而不是转录水平调控,这将妨碍出国看病过程中,DNA微阵列对它们的检测。
此外,是蛋白质而不是DNA执行细胞功能,我们已经知道mRNA的水平与其蛋白质产物的水平,不存在很好的相关性。出国看病后直接测量组织中蛋A质的水平和活性,将是决定整体细胞功能的好方法。其他的选择方法包括cDNA微阵列和蛋甶质组学分析,后期的DNA芯 片验证是关键的一步,因为存在患者变异和遗传异质性。