淋巴瘤治疗时模板扩增可实现肿瘤测序
发布日期：2018-02-18海外医学研究，从FFPE的正常组织和肿瘤样本上，收集8片或10片约1jxm厚的切片，并将其放在带正电荷的载玻片上。在显微镜下仔细地刮出并收集含有丰富肿瘤的切片。如果肿瘤组织小于总量的20%或30%，淋巴瘤转诊治疗后，就需要在激光捕获显微切割（LCM）下进行切割。DNA提取可采用酸/氯仿标准操作流程，在37T用蛋白激酶K孵化至少16h后操作。
配对的正常对照和肿瘤DNA，通过公认的引物或标记可用于PCR扩增，例如BAT25、BAT26、D2S124、D5S346和D17S250的不稳定性（MSI）检测，或对足够的模板进行PCR扩增，或采用足够的模板进行PCR扩增后，淋巴瘤转诊治疗可实现肿瘤组织的DNA测序。虽然蛋白质不能从FFPE组织中提取，但是RNA可以从FFPE组织中，分离供后续检测。如RT-PCR、互补DNA（dDNA）微阵列。
既往有一篇淋巴瘤转诊报道，显示70%的乙醇也可作为固定液，适合组织学检验和RNA回收，虽然这项技术尚未得到临床实验室的广泛认可。IHC是有效的辅助检查方法之一，在外科病理学实验室广泛应用。是因为它已常规用于评估肿瘤预后，及预测生物标志物，这项技术深受外科病理学家的喜爱，因为他们可以同时看到组织学形态，和蛋白质的表达模式。
淋巴瘤转诊治疗机构爱诺美康介绍，单个抗体混合剂，可用于单个切片或在同一个组织切片上，同时检测多个抗体。采用比色染色标记的抗体差异性，结合到蛋白质上，根据可视的染色结果判断蛋白质是否存在。抗原首次检测是采用冷冻切片，与荧光标记抗体反应。这项技术历史悠久，自1897年就开始使用DPaulErhlich曾在“锁钥原理”中提出，抗原抗体的相互作用，并和ElieMetchnikoff共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
在分子技术领域，IHC方法因其在评估癌症生物标志物方面具有简便、快捷及有效的特点而仍被使用。这里，分析在乳腺癌和大肠癌诊断，及许多肿瘤增殖指数（Ki-67）评估的典型例子。IHC分析的另一个优点在于，其可在FFPE组织切片上进行，而FFPE组织是可以长期保存的。新的扩增方法如以酪胺或聚合物为基础，标记与传统的IHC相比，在抗原检测上更为敏感。而且这些新的IHC方法，在淋巴瘤转诊治疗所需要的组织中也更少。
这种技术与DNA微阵列和基因测序等，其他分子检测技术相比更为便宜。因此其在机构和商业实验室被广泛应用，这种技术的缺点，是其结果仅仅是定性的或半定量的。阳性、阴性或有时不确定，由于染色质M及不同结果判读人员之间的个体差异，或同一人员不同时间解读的内部差异问题，淋巴瘤转诊治疗后，可能发生解读结果的不一致性。
