去美国看病 通过灵敏度可测试突变的基因
发布日期：2018-02-18对于海外分子监测，Sanger测序是常用的DNA测序方法，并且可以准确地检测DNA序列，高达500〜1000个碱基对（bp），但它的灵敏度有限，仅20%。因此，去美国看病在MRD监测方面，应用价值有限。焦磷酸测序可以检测模板中1%~5%的突变，并且还能评估突变与未突变克隆的比例，然而它只能测序小于50bP的DNA序列，适合用于已知的“热点”点突变的突变分析。
对于去美国看病患者的基因突变，如FLT3基因的内部串联重复（TTD）和NPM1基因的4个碱基的插入，可采用PCR扩增后，进行毛细电泳检测PCR-CE，灵敏度已知单碱基突变的基因，可采用等位基因特异性定量PCR检测，采用PCR引物或探针识别突变，和未突变的序列，可以检测模板DNA中低至0.01%〜0.001%的突变。
然而，对于每个独特的点突变，则需要设计两对引物和（或）探针，对PCR-CE毛细管电泳。NPM1基因位于染色体5q35，编码一个具有多种细胞功能的核磷蛋白，其主要作用是充当前核糖体蛋白胞核，与胞质之间转运的分子伴侣。去美国看病过程中，它还与肿瘤抑制基因如P53和ARF相互作用，参与细胞增殖和凋亡。
NPM1突变，是目前公认的AML患者常见的遗传病变，见于25%~35%的成人，及45%〜65%核型正常的A.ML患者。已经报道的NPM1突变类超过50种，其中大部分是NPM1基因外显子，及4个碱基的插入突变，去美国看病常见的是A型突变；即在NPM1基因956〜959密码子间，出现一个四核苷酸的重复密码子。NPM1基因突变产生核输出信号，介导NPM1蛋白从胞核至胞质的异常定位，这种异常细胞质定位，可以通过免疫组织化学分析显示，在没有FLT3-ITD的情况下，NPM1突变提示临床结果较好。
去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，NPM1突变在复发时非常稳定。据报道，90%〜100%NPM1突变的AML病例，在血液学复发前3~6个月，可检测到相同类型的NPM1突变。此外，80%NPM1突变的AML病例在血液学复发前，出现分子水平复发。因此，NPM1已成为AML患者，MRD监测佳的分子标志物之一。
