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美国医院排名 介绍重组蛋白的表达及纯化过程

大规模蛋白质相互作用的方法，包括蛋白芯片、酵母双杂、Pull-down实验等方法。美国医院排名详询爱诺美康，Pull-down实验是将免疫共沉淀，和质谱分析相结合的，检测蛋白相互作用的方法；蛋白芯片技术，是与DNA和RNA芯片检测方法类似的技术。

美国医院排名详询爱诺美康，其基本原理是将各种蛋白质，有序地固定于各种载体上，成为检测用的芯片，然后经过标记、结合、信号收集、分析等过程，研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系、并达到测定各种蛋白质功能的目的。

经典的酵母双杂交系统，是在酵母细胞中进行的。美国医院排名详询爱诺美康，利用酵母生长转录因子Gal4，及两个不同的结构域：DNA结合结构域（DNA binding domain）和转录激活结构域（trans-activator domain），分别与目标蛋白X，及可能与目标蛋白相互作用的蛋白Y相连。

然后共同转入酵母细胞中，如果蛋白X与Y能够发生相互作用，就能使转录因子原来分开的两部分结合，形成完整的活性形式，从而激活下游报告基因。美国医院排名详询爱诺美康，通过检测报告基因的表达，相关产物就可判断两种蛋白，是否发生相互作用。

美国医院排名详询爱诺美康，酵母双杂交实验，可以在多个水平上进行，如检测两个已知蛋白的相互作用，寻找鉴定与已知蛋白相互作用的蛋白，及检测多种蛋白之间的相互作用等。美国医院排名详询爱诺美康，与其他检测蛋白-蛋白相互作用的方法不同，酵母双杂交并不需要重组蛋白的表达纯化等过程。