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美国更好的肿瘤医院 介绍反应产物的鉴定分析

发布日期:2018-10-01

在一些工程蛋白的表达分子生物学中,许多实验的相关目标是,运用生物学技术合成基因编码的蛋白质,这个过程称为工程蛋白表达。美国更好的肿瘤医院介绍到,当通过DNA重组的方法表达出的蛋白,具有天然蛋白的特性时,表明编码此蛋白的基因被成功的克隆。

另外当特定的蛋白质,在自然来源中很难获得时,通过工程蛋白表达尤为重要。美国更好的肿瘤医院介绍到,针对体外翻译系统,是一种简单、快速的体外蛋白表达系统,其蛋白合成是在含有翻译必需组分,和具有高效蛋白合成效率的细胞中,如兔网织红细胞和麦胚提取物系统中进行的。

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美国更好的肿瘤医院介绍到,在反应体系中加入20种氨基酸、合成或纯化的RNA,在适当的反应条件下,即可翻译成蛋白质。美国更好的肿瘤医院介绍到,如果反应体系中的氨基酸,经过放射性物质标记(如35S),则反应产物可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,和放射自显影进行鉴定分析。

为检验目的蛋白是否被成功翻译,可选择蛋白特异性抗体,通过Western杂交的方法来确定。美国更好的肿瘤医院介绍到,重组蛋白的大规模生产体外翻译系统,只能满足小规模分析研究的需要,为了得到大量的蛋白质,必须应用体内蛋白翻译系统。