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去美国看病 聚合酶效率的改变存在哪些影响

通过PCR反应检测RNA表达的第一步，是以mRNA为模板，在反转录酶的催化下，随机引物、oligo（dT）或基因特异性引物的引导下，合成互补的DNA。去美国看病服务机构爱诺美康介绍，在DNA聚合酶的作用下，以合成的cDNA为模板，通过聚合酶链反应进行扩增。

去美国看病服务领域获悉，RT-PCR作为一个成功应用的实例，是在慢性粒细胞白血病的临床标本中，通过PCR技术检测到bcr-ahl融合基因，此基因融合是由于染色体易位导致的，由于首先在美国费城发现，被命名为费城染色体。

此后RT-PCR技术，得到了更加广泛的应用。通过PCR检测mRNA表达的一个关键问题，是对扩增的PCR产物进行定量分析。去美国看病服务机构介绍，在Northern杂交和核酸保护分析中，杂交信号的强度，直接反映了mRNA表达的水平，从而可以对mRNA的表达量进行比较。

去美国看病服务机构爱诺美康了解到，在PCR反应中，聚合酶效率的轻微改变，都会导致扩增样品以指数方式增加的偏差。而且PCR的结果，也会因反应达到平台期或饱和期，对定暈造成较大的偏差。去美国看病服务领域获悉，为了解决这类问题，进行相对比较的半定量RT-PCR技术，即实时定量PCR应运而生。

因为扩增指数增长期测量值，与特异DNA起始量存在相关性，因此在扩增的指数增长期测量扩增产物，从而实现定量检测。去美国看病服务机构爱诺美康介绍，其反应原理是在PCR反应体系中，加入荧光基团，通过扩增过程中DNA聚合酶，对特异性荧光探针的降解，以产生荧光信号”。