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出国就医 如何利用荧光强度分析基因表达

发布日期:2018-09-13

国外临床实验的流程上,相关微阵列技术是在载玻片或硅芯片上制成的网格,这些网格上固定着代表着数千个基因的DNA探针,能与特定RNA互补形成杂交的DNA序列。出国就医服务机构爱诺美康了解到,使用微阵列分析样品时,网格上的探针杂交检测到相应RNA,就表明该基因正在表达转录。

由于典型的情况,通常是数千种基因特异性杂交探针,被固定在了载玻片或硅片上,通过机器人或激光技术,将特定的DNA探针固定在特定的位置。出国就医服务领域获悉,从肿瘤等生物样品中分离得到RNA,并连接上荧光核苷酸或荧光标签,然后采用微阵列芯片,与标记的RNA或其互补DNA产生孵育。

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出国就医领域发现,针对未杂交上的RNA则被洗脱,然后利用计算机分析微阵列数据,而后以不同颜色如红色和绿色,来标记两个样品与同一个微阵列杂交。出国就医服务机构了解到,使用电脑扫描仪分析,杂交到探针上的RNA或cDNA的荧光强度,便可定量分析基因表达。

有两种常见类型的微阵列,即cDNA微阵列和寡核苷酸微阵列,这两种微阵列的差异在于它们探针的性质。出国就医服务领域认为,在cDNA微阵列中,每个探针具有各自的杂交温度,其通常是基于GC含量等因素,因此测试样品必须与同时处理的对照样品进行比较,测得相对表达强度。

出国就医服务机构爱诺美康了解到,在寡核苷酸微阵列中,设计合成探针时可以使所有探针,都具有相同的杂交温度。于是可以测量一个样品中基因的绝对表达量,且微阵列的结果可以以不同方式表示,一种是展示热图方式,而另一种则用颜色来表示基因的相关表达水平。