出国治疗 如何评估芯片完整性及样品质量
发布日期:2018-02-26临床研究上证明,基因芯片由成千上万个DNA探针,以预知的模式固定在基片上,或固定在磁珠上而随机分布在芯片上。基因表达阵列可检测荧光标记的cDNA片段,而比较基因组杂交阵列(aCGH),可检测荧光标记的基因组DNA片段。出国治疗后,由于基因芯片检测平台的复杂性和多变性,必须在临床实验室使用之前和使用中验证其性能。
任何基因芯片平台的重复性,应在临床使用之前得到验证,而且重复性验证通常由不同技术人员在不同吋间完成。比如,如果一种RNA表达模式,用于对患者分层成不同的预后群,即使在不同时间进行分析,相同的样品应该分到同样的群组里。出国治疗用一个基因芯片,检测大M基因的表达水平,或鉴定基因拷贝数的改变时,在不同的批次检测中应当获得相同的表达水平,或基因拷贝数的改变。
出国治疗服务机构爱诺美康介绍到,当验证一个基因芯片检测平台的检测性能准确性时,由于探针设计、用于标化的管家基因的选择、标化技术等各方面存在的差异,利用其他表达芯片或qPCR进行验证可能会得到不一样的结果。当验证小片段缺失或是较好的性能的FISH探针时,即使利用作为“金标准”的FLSH验证,比较基因组杂交阵列(aCGH)平台的准确性,也可能得到不一样的结果。
当为基因芯片平台设计准确性研究时,还需确认所用的两种技术或平台的标准化手段,或检测敏感性是相当的。在进行表达分析之前,应先检测所用RNA样品的质量。出国治疗对于表达芯片,通常是利用RNA完整性值(RIN),来评估样品中RNA的质量。高RIN样品中比RIN低的样品,通常含有更完整的RNA。
开展基于cDNA合成时结合,在poly-A的转录本的芯片分析实验时,样品中的RIN数量对于检测的成功至关重要。出国治疗后发现,然而也有些基因芯片平台,设计成了可以精确 定量已降解的转录子,所以样品中的RIN,对样本性能的影响微乎其微。