如何在肿瘤组织中分离和纯化其线粒体?
发布日期:2021-05-19国外临床上,针对致瘤性线粒体DNA突变的严格评价,有大量文献证实,线粒体DNA突变促进了人类脑瘤、及其他各种癌症的发生。另外,线粒体DNA变化,也能改变细胞能量代谢。
为了确定线粒体DNA突变,是否促进脑肿瘤能量代谢缺陷,国外也从致病性突变角度进行了研究。这些肿瘤,包含了大多数恶性脑肿瘤生长行为,其中2种肿瘤如室管膜母细胞瘤(EPEN)和星形细胞瘤(CT-2A),通过将20-甲基胆蔥注入C57BL/6J小鼠脑内,获得阳性。
另外3种肿瘤VM-M2、VM-M3和VM-NM1,由VM近交小鼠脑内自发形成,而其自发性脑肿瘤高发的特征,却独一无二。
而后,VM-M2和VM-M3肿瘤表达髓系/间充质细胞的多重属性,显示出了人类多形性胶质母细胞瘤的侵袭性生长行为。由于VM-NM1生长迅速,但在脑外生长时,并无高度侵袭性和转移性。
专家组又从5种脑肿瘤中,制备了克隆细胞系,然后均生长于同源小鼠宿主皮下,这样做是为了获得足够的肿瘤组织,再根据已建立的流程,来分离和纯化线粒体。
并且,每种肿瘤的线粒体DNA,都与从相应的正常同源小鼠宿主品系中、纯化的脑线粒体DNA进行比较。通过对各个肿瘤全线粒体基因组直接测序,并与相应宿主小鼠品系的正常脑组织进行比较,几乎未发现,存在基因改变。