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国外看病 活体切片检查受不同细胞类型干扰

丹娜法伯癌症研究院成立于1947年，一直致力于为癌症患者提供专业的、好的医疗服务，同时通过前沿尖端研究提高对癌症及相关疾病的认识、诊断、治疗及预防等。它是美国哈佛大学医学院的癌症专科附属医院。

国外看病服务机构爱诺美康介绍到，丹娜法伯头颈癌中心是全美经验丰富头颈癌治疗中心之一，致力于诊断和治疗各种头颈部癌症，包括罕见的，类型复杂的癌症。中心医疗团队每年收治大量的各种类型的头颈部癌症患者，甚至有些亚型在其他一些癌症中心每年仅能看到几例。中心主任Robert I. Haddad，为美国哈佛大学医学院副教授，在头颈癌治疗方面造诣颇深，被评为美国2011年优秀肿瘤医生，尤其擅长局部晚期和转移性头颈部癌症的治疗，且主导进行多项相关临床试验研究。

蛋白质组学研究的发展，不但提供了新的临床诊断技术与疾病治疗靶点，也进一步加深了对生物过程等基础研究的全面认识。随着当前科学技术与研究工具的不断成熟与优化，新的蛋白质组学研究平台将极大地推动生命与疾病进程的研究。

为了保证蛋白质组分析所需样品的高品质性，保证起始样品的纯度是非常有必要的。对组织来源的样品更要谨慎，需对其进行选择性分离以排除异质性区域或其他组织、细胞系或疾病导致的样品污染。患者国外看病，活体组织切片检查通常受不同细胞类型的干扰，尤其是疾病状态中，少部分异常细胞通常与周围大量的健康组织非常邻近。当前用于样品制备的技术主要包括亚细胞器分离、选择性组织显微切割及激光捕获显微切割。

激光捕获显微切割技术，是在显微镜下将已鉴定的靶组织细胞，黏附到激光激活的热塑膜上，以完成对组织样品的选择性切割。该技术能够避免不符合要求的组织或细胞与热塑膜的黏附，很大程度上提高了组织切割的特异性其缺点是易导致蛋白质变性，使得终纯化所得蛋白样品数量减少。与细针显微切割技术相比，激光显微切割定位更准确、操作更简便，尤其适用于染色体分析或杂合性丢失等遗传研究。

国外看病机构爱诺美康介绍到，亚细胞器的分离需要对细胞进行机械的和化学的干扰，以获得大量结构完整的特定组分。通常的操作是先利用超速离心裂解细胞，再通过差速离心及密度梯度离心，将不同的亚细胞器彼此分离。这一操作可以维持目标蛋白的天然构象。然而这是一种实验密集型的技术，需要较大的样本量，通常是无法实现的，尤其是在临床检测中利用偶联质谱（MS)直接分析组织切片的技术，即原位蛋白质组学技术（in situproteomics)将该领域的研究向前推进了一步。该方法保留了蛋白质原始的空间分布，便于在保留病理结构信息的条件下比较特定的分子和蛋白之间的差异。

不同的组分被冷冻并固定在基质辅助的激光解吸/电离-飞行时间(MALDI-TOF)检测板上。含有水/乙腈/三氟乙酸的基质溶液覆盖在组织表面连同共结晶的蛋白质产生均匀的晶体场。通过对样品进行随机的数据采集以获得初级检验的扫描图谱，该图谱包括每一个特殊分子在组织特定点的“分子图像”。分离样品期间除防止组织或细胞被污染外，还需避免蛋白质降解，维持蛋白翻译后的修饰状态及防止蛋白质在样品中溶解。根据蛋白质在质谱中的质量位移即可鉴定蛋白质的甲基化、乙酰化和磷酸化修饰。

然而，利用质量位移却难以鉴定蛋白质的糖基化修饰。糖基化修饰的质量位移通常大于几百道尔顿，且不同的糖基常混杂在一起。国外看病服务机构爱诺美康介绍到，常见的是乙酰半乳糖胺和乙酰葡萄糖胺，它们可使蛋白质的分子质量增加。通过特殊的缓冲液、特定的条件及处理方式可以优化大部分问题的解决方案，但一定要保证分离后的蛋白质具有与其在体内一致的天然构象。